人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒
簡要描述:人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒用于檢測血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)的濃度。
產(chǎn)品型號: SYP-H0656
所屬分類:人ELISA
更新時(shí)間:2024-10-31
詳細(xì)說明:
本試劑盒采用雙抗體夾心兩步法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。在預(yù)包被抗人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)抗體(固相抗體)的微孔酶標(biāo)板中,加入人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)校準(zhǔn)品和待測樣本,再加入shengwusu標(biāo)記抗體,經(jīng)過溫育與充分洗滌后,再加入HRP偶聯(lián)的親和素,經(jīng)過溫育與充分洗滌,去除未結(jié)合的組分,在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-shengwusu標(biāo)記抗體-親和素酶的夾心復(fù)合物。加底物A和B,產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,在終止液作用下,最終轉(zhuǎn)化為黃色,在酶標(biāo)儀450nm波長上測定吸光度(OD值),吸光度(OD值)與待測樣品中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線,可以計(jì)算出樣本中人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)的濃度。
操作步驟
推薦樣本稀釋方案:建議先做預(yù)實(shí)驗(yàn)摸索樣本適合稀釋倍數(shù),然后再做正式實(shí)驗(yàn)。
所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫,標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品,建議做復(fù)孔。
1、按前面說明書描述的方法,配制好試劑盒各種組分的工作液。
2、從鋁箔袋中取出所需板條,剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
3、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、yangben稀釋液孔、空白孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,yangben稀釋液孔加yangben稀釋液50μL,空白孔不加,樣本孔加待測樣本50μL。除空白孔外,每孔加入shengwusu抗體100uL,用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育60min。
4、揭開封板膜,棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)5次。若使用自動洗板機(jī),請按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板,添加浸泡30s的程序,可以提高檢測的精度。洗板結(jié)束,加底物前,要在干凈不掉屑的紙上,充分拍干反應(yīng)板。
5、除空白孔外,每孔加入HRP標(biāo)記親和素100uL,用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育20min。
6、重復(fù)步驟4。
7、將底物A和B按1:1體積充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板,37℃水浴鍋或恒溫箱避光溫育15min。
8、所有孔加入終止液50μL,在450nm波長酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度(OD值)。
備注:圖片僅供參考。僅供科研,不可用于臨床。